温州上海烈冰生物单细胞多组学多组学测序

reads数、基因表达量及细胞数量判定过程中：以捕获5000个细胞、100G的测序量为标准，每个细胞的reads数大约在50k左右；每个细胞的基因中位数取决于样本的细胞类型，例如成熟的B，T，粒细胞数量较多的组织中，由于该类型细胞表达的基因数普遍较少，导致基因中位数下降。而某一疾病组织、或者体外培养的如干细胞等，他们的基因表达数较高，甚至可以超过1万，这就导致该类样本基因中位数非常高。因此，我们对细胞数量以及基因中位数确认时，需要考察实际组织的细胞组成。烈冰生物首批引进 Chromium X 平台，开启百万级通量单细胞测序新时代。温州上海烈冰生物单细胞多组学多组学测序

2016年发表的DR-seq和G&T-seq技术,实现在单细胞内同时进行基因组和转录组的测序分析,使得研究人员能够在分析细胞间基因组差异和基因表达异质性的同时,进一步理解基因组序列差异、拷贝数变异与转录组异质性之间的关系.随后在同一个单细胞内,基于转录组、染色质可及性、染色质构象、DNA拷贝数、DNA甲基化、蛋白质丰度或者空间状态等整合分析的多组学方法也相继出现。相较于利用不同的单细胞单组学测序方法从一类细胞中分别获取转录组、基因组、表观遗传组等进行分析,单细胞多组学测序技术可以从同一个单细胞中同时获取多种组学数据,可以更好地反映细胞在特定状态下各组学间的关联以及复杂的分子调控网络。武汉上海烈冰生物单细胞多组学数据分析可视化未来，单细胞多组学测序技术的策略会继续向转录组结合其他多个组学的三组学甚至四组学方向发展。

单细胞测序结果动辄上百G数据量，庞大的数据对于分析平台和分析能力有着很高的要求，首先针对下机数据的质控环节：单细胞测序产生数亿的结果序列，不可避免的会出现低质量的测序结果，存在各种情况的序列污染。因此序列过滤及质量评估就会变得极为重要。序列质量主要通过测序质量值Q20/Q30的占比来表征，即碱基测序结果的错误率在1%/0.1%以下的比例。理想的测序结果reads的碱基质量均高于30。保证数据获得后第一步的处理结果的准确性，为后续细胞类型鉴定准确和功能分析打下坚实基础。

单细胞技术让我们在基因组学、表观基因组学、转录组学和蛋白质组学等层面上解析了许多错综复杂的生命密码。随着科技的进步，我们发现整合多个组学的信息可以更仔细地观察细胞之间的可变性，更清楚地识别特定细胞及其功能。单细胞多组学在临床诊断、疾病分型以及细胞发展机制这些重大生命科学领域方面的应用也将越来越广。单细胞技术从 2009 年发展到现在，研究范围不再局限于转录组，而是扩展到了基因组、免疫组、表观组、蛋白组等多组学水平。单细胞多组学测序主要包含细胞分离、文库构建、高通量测序和生物信息学分析等步骤。

未来,单细胞多组学测序技术的发展,一方面将集中在对现有技术的优化和新方法的开发.现有技术的优化不仅包括建库手段、测序技术和算法工具等方面,还包括优化实验设计、自动化实验流程以及提升实验效率.为了更好地检测到各种大分子的特征,研究者可以考虑从生物、化学和物理等多学科中寻找解决方案.此外,新的计算方法和分析工具能帮助研究者越过一些实验限制,发现更多新奇的生物过程.例如,拟时序分析(pseudotimetrajectory)将有助于人们理解早期胚胎发育的细胞分化轨迹.新方法则可以更多地关注目前未能检测到的一些重要的基因表达调控层面,如DNA三维结构、非编码RNA和胞内蛋白等.另一方面,目前的单细胞多组学测序技术发展势头强劲,研究者不断研发并丰富着单细胞测序工具箱,各种组学方法百家争鸣.未来,研究者需要从众多相似的方法中筛选出一些稳定、通用、成本低、可商业化的方法,并进一步扩大其实际应用范围。单细胞多组学可从整体层面快速有效地探寻疾病发生、发展的根本原因或药物作用靶点等信息。北京单细胞多组学平台

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单细胞测序是指针对单个细胞进行全转录组测序分析，可精确地描述每一个细胞的状态，在异质性发育过程中具有不可忽视的应用价值。然而，单细胞测序无法给出固态异质化组织中细胞空间排布信息，对于揭示发育过程、病理微环境都存在很大的局限性。空间转录组测序以点阵形式记录病理切片细胞的空间信息并进行测序，可以精确指示点阵内的全部基因表达情况。空间转录组测序的加入，无疑让单细胞测序如虎添翼，更精确地勾勒了组织水平的异质性。温州上海烈冰生物单细胞多组学多组学测序

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